2025-09-22
คําสําคัญ: โพรพรานอลอล โครมาโตเกอรี่เหลวที่มีประสิทธิภาพสูง
1อุปกรณ์และสารแก้ไข
1.1 รายการการตั้งค่าของระบบ HPLC
| ไม่ ไม่ | โมดูล | Qty |
| 1 | เครื่องตรวจจับ UV3400 | 1 |
| 2 | P3400B ปั๊มสี่เหลี่ยม | 1 |
| 3 | CT3400 เปลือกเตาเสา | 1 |
| 4 | AS3400 เครื่องเก็บตัวอย่างด้วยตัวเอง | 1 |
| 5 | สตาร์ทแล็บ NetCDS Workstation | 1 |
| 6 | C18 250*4.6 มิลลิเมตร, 5μm | 1 |
1.2 ตัวปฏิกิริยาและสารแก้ไขมาตรฐาน
ตารางที่ 2 ตัวปฏิกิริยาและสารแก้ไขมาตรฐาน
| ไม่ ไม่ | เครื่องปฏิกิริยาและมาตรฐาน | ความบริสุทธิ์ |
| 1 | แอสเตนไนทรีล | เกรด HPLC |
| 2 | โซเดียมโดเดซิลซัลเฟต | AR |
| 3 | เททราบุติแลมโมเนียมไดฮิโดรเจนฟอสเฟต | AR |
| 4 | NaOH | AR |
| 5 | กรดซัลฟูริก | AR |
| 6 | N-ไนตรโซ-โปรปราโนโลล | 99.85% |
1.3 วัสดุการทดลองและอุปกรณ์ช่วย
เครื่องทําความสะอาด ultrasonic
เครื่องผสมเวอร์เท็กซ์
2วิธีการทดลอง
2.1 การเตรียมสารละลาย
2.1.1 2mol/L โซเดียมไฮโดรออกไซด์ โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 4 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 5 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 5 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 5 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 5 กรัม โซเดียมไฮโดรออกไซด์ 5 กรัม
2.1.2 อาเซตอนิตรีล-น้ํา-กรดซัลฟูริก (55:45:0.1) ผสม: นําซัลฟาตโซเดียมโดเดซิลซัลฟาต 1.6 กรัม และซัลฟาตเทตราบุติลาโมเนียมไดฮิโดรเจน 0.31 กรัม เพิ่มกรดซัลฟูริก 1 มิลลิตร, น้ํา 450 มิลลิตร และอะเซโตนิทรีล 550 มิลลิตร ปรับ pH เป็น 33 กับสารละลายซาเดียมไฮโดรออกไซด์ 2 โมล/ลิตรและผสมให้ดี
2.1.3 สารละลาย: เหมือนกับระยะเคลื่อนย้าย
2.1.4 โซลูชั่นเชิงเส้น: น้ําหนัก N-Nitroso-propranolol มาตรฐานมาตรฐานที่เหมาะสมอย่างแม่นยําจะละลายและละลายด้วยระยะเคลื่อนไหวเพื่อได้รับสารละลายที่มีประมาณ 200ng ต่อ 1mL เป็นสารละลายหลักมาตรฐาน. จากนั้นจะโอนปริมาณที่เหมาะสมของสารละลายสต็อปไปในกล่องขนาด 100mL 6 ชิ้นและผสมให้ดี เพื่อเตรียมชุดการทํางานแบบมาตรฐานที่มีปริมาณ 0.8ng/mL, 1ng/mL, 2ng/mL, 3ng/mL, 4ng/mL และ 6ng/mL
2.1.5 สูตรมาตรฐานมาตรฐาน: น้ําหนักมาตรฐานมาตรฐาน N-Nitroso-propranolol จํานวนที่เหมาะสมอย่างแม่นยําจะละลายและละลายด้วยระยะเคลื่อนไหว เพื่อเตรียมสารละลายที่มี N-Nitroso-propranolol ประมาณ 2 ng ต่อ 1 ml เป็นสารละลายมาตรฐานมาตรฐาน.
2.2 การจัดตัวอย่าง
2.2.1 ตัวอย่างของสารละลาย: น้ําหนักจํานวนที่เหมาะสมของโปรพราโนโลล ไฮโดรคลอริด แผ่นข้นละลายและละลายด้วยระยะเคลื่อนไหวเพื่อเตรียมสารละลายที่มีประมาณ 0.27mg ของโปรพรานอลอลต่อ 1mL ในรูปของสารแก้วตัวอย่าง
2.2.2 ความแม่นยําของสารละลาย: น้ําหนักอย่างแม่นยําประมาณ 297mg ของยาพรูปรานอลอลไฮโดรคลอริดเป็นผงละเอียดในกล่องขนาด 100mLเพิ่มปริมาณที่เหมาะสมของ N-Nitroso-propranolol สูตรมาตรฐานมาตรฐาน, ยาละลายและละลายจนถึงเครื่องหมายด้วยระยะเคลื่อนไหวเพื่อเตรียมตัวอย่างที่ผสมผสาน 100% ผสมให้ดีเพื่อได้รับสารละลายความแม่นยํา
3ผลการทดลอง
3.1 ความเฉพาะ
รูปที่ 2 โครมาโตแกรมความเฉพาะ
หมายเหตุ: สารละลายไม่ขัดขวางการตรวจพบของ N-Nitroso-propranololและจุดสูงของสารสกัดอื่น ๆ ในสารแก้ไขการทดสอบก็ไม่ขัดขวางการกําหนดสารสกัด N-Nitroso-propranolol.
3.2 การทดสอบแบบเส้นตรง
รูปที่ 3 กุ้งมาตรฐานของความสกปรกของ N-Nitroso-propranolol
หมายเหตุ: ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าสัมพันธ์สัมพันธ์ (R) ของเส้นโค้งการทดสอบภาวะไม่สะอาดของ N-Nitroso-propranolol กว่า 0999, ตอบสนองความต้องการของการทดสอบ
3.3 การทดสอบความซ้ํา
รูปที่ 4 โครมาโตแกรมของ 6 การฉีดซ้ําสําหรับมาตรฐาน 2ng/mL
ตารางที่ 3 ข้อมูลจากการฉีดซ้ํา 6 ครั้ง สําหรับมาตรฐาน 2 ng/mL
| สารประกอบ | ระยะเวลาการเก็บรักษา (นาที) | พื้นที่สูงสุด (mAU) |
| N-ไนตรโซ-โปรปราโนโลล | 2.935 | 3.963 |
| 2.934 | 3.979 | |
| 2.933 | 3.984 | |
| 2.932 | 3.964 | |
| 2.932 | 3.996 | |
| 2.932 | 3.944 | |
| ค่าเฉลี่ย | 2.933 | 3.972 |
| RSD (%) | 0.043 | 0.464 |
หมายเหตุ: ดังที่แสดงในตารางด้านบน ความซ้ําซ้ําระยะเวลาของ N-nitroso-propranolol คือ 0.043%, และความซ้ําซ้ําพื้นที่สูงสุดคือ 0.464%, แสดงถึงความซ้ําซ้ําที่ดี.
3.4 การทดสอบความถูกต้อง
รูปที่ 5 โครมาโตแกรมความแม่นยําของ N-Nitroso-propranolol ในแท็บเล็ต
ตารางที่ 4 ความแม่นยําของโปรพราโนโลล ไฮโดรคลอรีด แผ่น (N- ไนตรโซ- โปรพราโนโลล)
| ระดับ | ระดับพื้นฐาน (ng) | จํานวนที่เพิ่มขึ้น (ng) | จํานวนที่ได้รับคืน (ng) | อัตราการฟื้นฟู (%) | ค่าเฉลี่ย (%) |
| 100% | 0.00 | 200.00 | 201.662 | 100.831 | 101.38 |
| 100% | 0.00 | 197.331 | 98.666 | ||
| 100% | 0.00 | 193.958 | 96.979 | ||
| 100% | 0.00 | 206.093 | 103.046 | ||
| 100% | 0.00 | 209.416 | 104.708 | ||
| 100% | 0.00 | 208.157 |
104.079 |
หมายเหตุ: การฟื้นฟูของ N-Nitroso-propranolol ในตัวอย่างหกตัวอยู่ที่ 96.98% ถึง 104.71% โดยมีค่าฟื้นฟูเฉลี่ย 101.38%.
3.5 การทดสอบ LOD
รูปที่ 6 โครมาโตแกรมการทดสอบของ N-Nitroso-propranolol ในปริมาณ 2ng/mL สมาธิมาตรฐาน
ตารางที่ 5 ข้อมูลการทดสอบมาตรฐานของ N-Nitroso-propranolol ในปริมาณ 2ng/mL สมาธิ
| ชื่อ | ระยะเวลาการเก็บรักษา (นาที) | พื้นที่สูงสุด (mAU) | SNR |
| N-ไนตรโซ-โปรปราโนโลล | 2.946 | 3.994 |
39.689 |
หมายเหตุ: จากข้อมูลการทดสอบสําหรับมาตรฐานมาตรฐาน N-nitroso-propranolol ในปริมาณ 2ng/mL ในตารางด้านบนปริมาณขีดจํากัดทางทฤษฎีสําหรับ N-nitroso-propranolol ได้คํานวณเป็น 0.151ng/mL โดยใช้สัดส่วนสัญญาณ-เสียง 3: 1 เป็นเกณฑ์ขั้นต่ําการตรวจจับ
3.6 การทดสอบแบรนด์แท็บเล็ต
รูป 7 โครมาโตแกรมการทดสอบของเม็ดแบรนด์
หมายเหตุ: N-Nitroso-propranolol ไม่ถูกตรวจพบในเม็ดแบรนด์
4สรุป
A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)ตามเอกสารนี้ ค่านิยมรับประทาน (AI) ได้ถูกคํานวณเป็น 1500 ng/ วัน โดยพิจารณายอดปริมาณต่อวันสูงสุดของยานี้ (200 mg).5ppm การตรวจสอบวิธีการถูกดําเนินการโดยใช้ Wayeal's ระดับความสามารถสูงของสารเรื้อรัง chromatography (HPLC) พร้อมเครื่องตรวจจับ UVตัวอย่างของแท็บเล็ตถูกวิเคราะห์โดยใช้วิธีการตรวจสอบที่ผ่านการรับรองทั้งนี้ข้อมูลทั้งหมดที่กล่าวมาตรงกับความต้องการของยาสําหรับเครื่องมือ
ส่งข้อสอบของคุณตรงมาหาเรา
