2025-07-29
การกําหนดซากอนติบอติกคีนอลอนในเนื้อไก่ โดย Wayeal's LCMS-TQ9200 Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LC-MS/MS) System
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsนอกจากนี้ "GB 31658.17-2021 มาตรฐานความปลอดภัยอาหารแห่งชาติ - การกําหนดเทตราไซคลีน Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
คําสําคัญ:LC-MS/MS คีโนโลน เหลือยาสําหรับการแพทย์สัตว์ ความปลอดภัยของอาหาร
Wayeal LCMS-TQ9200 ระบบจารึกจารึกจารึกเหลว-เทนเดมมัสซิสเปคโทรเมตร
วิธีการฉลากสีเหลว
คอลัมน์ Chromatography: C18 3.0x100 มิลลิเมตร
ขั้นตอนเคลื่อนไหว: A: 0.1% เมธาโนลกรดมุม B: 0.1% โซลชั่นกรดมุม
อัตราการไหล: 0.4mL/นาที
อุณหภูมิคอลัมน์: 45°C
ปริมาณการฉีด: 3μL
วิธีสเปคตรเมตรมวล
ตารางที่ 1 ปารามิตรแหล่งไอออนการวัดขนาดของมวล
| แหล่งไอออน | ESI โหมดไอออนบวก |
| โลเตจของแหล่งไอออน | 5500V |
| อัตราการไหลของก๊าซการละลาย | 18000 mL/นาที |
| อัตราการไหลของก๊าซเนบูเลียเซอร์ | 2000mL/นาที |
| อัตราการไหลของก๊าซผ้า | 5000 mL/นาที |
| อัตราการไหลของก๊าซชน | 800μL/นาที |
| อุณหภูมิการละลาย | 450 °C |
| อุณหภูมิก๊าซผ้าม่าน | 150 °C |
ตารางที่ 2 ปารามเมตรสเปคตรเมตรมวลสําหรับสารประกอบแต่ละสาร
| สารประกอบ | Q1 | Q3 | ความสามารถในการแยกกลุ่ม (V) | พลังงานการชน (V) |
| ไอน้ําตาลโอกซอลินิก | 262.1 | 244* | 100 | 25 |
| 160 | 100 | 50 | ||
| ฟลูเมควีน | 262.1 | 202 | 115 | 44 |
| 244.1* | 115 | 24 | ||
| นอร์ฟล็อกซาซีน | 320.1 | 302.1* | 90 | 27 |
| 233.2 | 90 | 33 | ||
| เอโนคซาซีน | 321.2 | 234 | 100 | 38 |
| 303* | 100 | 30 | ||
| ซิโฟฟล็อกซาซีน | 332.2 | 231 | 100 | 49 |
| 288 | 100 | 25 | ||
| พีฟลอ็กซซีน | 334.1 | 316* | 110 | 29 |
| 233.2 | 110 | 35 | ||
| โลเมฟล็อกซาซิน | 352.1 | 265.1* | 110 | 31 |
| 334 | 110 | 29 | ||
| ดานอฟล็อกซาซีน | 358.1 | 340.1* | 100 | 32 |
| 283.1 | 100 | 32 | ||
| เอ็นโรฟล็อกซาซีน | 360.2 | 316.1 | 110 | 27 |
| 245.1* | 110 | 38 | ||
| โฟล็อกซาซีน | 362.1 | 318.3 | 75 | 25 |
| 261.2* | 75 | 34 | ||
| มาร์บอฟล็อกซาซีน | 363.2 | 72.1* | 100 | 25 |
| 345.2 | 100 | 29 | ||
| ซาราฟล็อกซาซีน | 386.1 | 299.1* | 110 | 38 |
| 342 | 110 | 27 | ||
| ไดฟล็อกซาซีน | 400.2 | 299.1 | 110 | 38 |
| 382.2 | 120 | 30 |
หมายเหตุ: ไอออนที่ระบุด้วย * คือไอออนปริมาณ
1ผลการทดลอง
1.1 รูปแบบของจุดสูงสุด
การกําหนดของ 13 ยาปฏิชีวอนคินอลอนได้เสร็จสิ้นภายใน 11 นาทีของยาปฏิชีวอนคินอลอน สารเคราะห์ทั้งหมดแสดงผลการตอบสนองสัญญาณที่แข็งแกร่ง ซึ่งตอบสนองความต้องการสําหรับการคณิตศาสตร์การทดลอง
รูปที่ 1 โครมาโตแกรมของ 13 คินโอนอน แอนติบอยติก
1.2. ระยะทาง
จํานวนที่เหมาะสมของสารละลายมาตรฐานผสมคินอลอนถูกละลายเป็นชุดเพื่อเตรียมมาตรฐานการปรับระดับที่ครอบคลุมความเข้มข้นจาก 2 ถึง 500 ng/mLการประเมินความเป็นเส้นตรงแสดงให้เห็นความสอดคล้องที่ดีกับความเข้มข้นนามคออฟเฟกชั่นการกําหนด (R2) อยู่ในช่วง 0.9921 ถึง 09998, ยืนยันความเป็นเส้นตรงที่น่าพอใจสําหรับส่วนประกอบทั้งหมด
ตาราง 3 ตารางระยะเส้น
| สารประกอบ | ระยะเส้น | คออฟเซนต์ความสัมพันธ์เชิงเส้น R2 |
| ไอน้ําตาลโอกซอลินิก | 2-500ng/mL | 0.9989 |
| ฟลูเมควีน | 2-500ng/mL | 0.9988 |
| นอร์ฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9968 |
| เอโนคซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9989 |
| ซิโฟฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9982 |
| พีฟลอ็กซซีน | 2-500ng/mL | 0.9992 |
| โลเมฟล็อกซาซิน | 2-500ng/mL | 0.9921 |
| ดานอฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9969 |
| เอ็นโรฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9998 |
| โฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9941 |
| มาร์บอฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9997 |
| ซาราฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9946 |
| ไดฟล็อกซาซีน | 2-500ng/mL | 0.9973 |
รูปที่ 2 ผลลัพธ์ระยะเส้นสําหรับยาปฏิชีวอนคินอลอนที่คัดเลือก
1.3ขั้นต่ําการตรวจหา (LOD) และขั้นต่ําการปรับปริมาณ (LOQ)
มาตรฐานความปลอดภัยอาหารแห่งชาติ GB 31658.17-2021 ระบุขีดจํากัดการตรวจหา (MDL) 2μg/kg และขีดจํากัดการปรับปริมาณ (MQL) 10μg/kgสารประกอบเป้าหมายทั้งหมดแสดงให้เห็นว่าสัดส่วนสัญญาณกับเสียงมากกว่า 3 อย่างมีนัยสําคัญที่ 2μg/kg และ 10 ที่ 10μg/kg, ซึ่งตรงกับความต้องการความรู้สึกที่ระบุในมาตรฐานแห่งชาติ
ตารางที่ 4 อัตราสัมพันธ์สัญญาณกับเสียงเสียง สําหรับขีดจํากัดการตรวจพบและการกําหนดปริมาณของสารประกอบเป้าหมาย
| สารประกอบ | SNR (S/N) | |
| 2μg/kg | 10μg/kg | |
| ไอน้ําตาลโอกซอลินิก | 111.26 | 359.11 |
| ฟลูเมควีน | 59.64 | 244.73 |
| นอร์ฟล็อกซาซีน | 70.16 | 392.57 |
| เอโนคซาซีน | 23.74 | 80.26 |
| ซิโฟฟล็อกซาซีน | 37.91 | 99.26 |
| พีฟลอ็กซซีน | 28.70 | 125.81 |
| โลเมฟล็อกซาซิน | 48.54 | 165.84 |
| ดานอฟล็อกซาซีน | 105.74 | 348.10 |
| เอ็นโรฟล็อกซาซีน | 35.97 | 120.82 |
| โฟล็อกซาซีน | 51.67 | 287.26 |
| มาร์บอฟล็อกซาซีน | 190.11 | 399.38 |
| ซาราฟล็อกซาซีน | 38.11 | 160.79 |
| ไดฟล็อกซาซีน | 25.85 | 149.29 |
รูปที่ 3 LOD/LOQ โครมาโตกรามสําหรับคินโคลอนที่คัดเลือก
1.4การทดสอบความแม่นยํา
การฉีดสารละลายแบบสัดส่วนของยาปฏิชีวอนคินอลอนในปริมาณสามปริมาณ (10, 50, และ 100 ng/ mL) เป็นเวลา 6 ครั้ง เพื่อเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาและความแตกต่างของพื้นที่สูงสุดดังแสดงในตารางด้านล่าง, สารประกอบคินอลอนทั้งหมดที่ทดสอบแสดงให้เห็นว่าการหันห่างในเวลาการเก็บรักษาที่น้อยกว่า 0.3% และการหันห่างในพื้นที่สูงสุดที่ต่ํากว่า 5%ที่ตรงกับความต้องการมาตรฐานระดับชาติอย่างเต็มที่ RSD ≤ 15% สําหรับความแม่นยํา.
ตารางที่ 5 การทดสอบความแม่นยําของสารประกอบต่าง ๆ
รูปที่ 4 โครมาโตแกรมความแม่นยําของสารประกอบที่ถูกเลือก
2สรุป
วิธีนี้ใช้ Wayeal LCMS TQ9200 ระบบจุลสีเหลว-เทนเดมมัสสเปคตรเมตรสําหรับการกําหนดยาปฏิชีวอนคินอลอนในตัวอย่างไก่ข้อมูลการทดลองแสดงให้เห็นถึงการทํางานของโครมาโตกราฟิคที่ดีมาก ด้วยรูปร่างของจุดสูงที่กําหนดได้ดี และไม่มีการค้างสําหรับตัวแอนาลิตทั้งหมด, โดยตอบสนองความต้องการความรู้สึกที่กําหนดไว้ในมาตรฐานระดับชาติ วิธีการแสดงความเป็นเส้นตรงที่ดีด้วยสัมพันธ์สัมพันธ์ (R2) กว่า 0.99 สําหรับเส้นโค้งการปรับทั้งหมดพร้อมกับความสามารถในการพัฒนาใหม่ที่ดีเยี่ยมที่พิสูจน์โดยการหันห่างเวลาการเก็บรักษาที่ต่ํากว่า 0การวิเคราะห์ของชุดตัวอย่างไก่ที่ปรุงแต่งกันอย่างอิสระ 3 ชุด ไม่พบซากของยาปฏิชีวอนคินอลอน These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
ส่งข้อสอบของคุณตรงมาหาเรา
