การกําหนดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอดยอด

แก๊สโครมาโตกราฟีมีบทบาทสำคัญในการตรวจจับสารตกค้างของเรซินในซาโปนินของ Panax notoginseng Panax notoginsengซาโปนินทำหน้าที่เป็นวัตถุดิบหลักสำหรับยารักษาโรคหัวใจและหลอดเลือดและหลอดเลือดสมอง เช่น Xueshuantong และกระบวนการทำให้บริสุทธิ์โดยทั่วไปจะใช้เรซินดูดซับที่มีรูพรุนขนาดใหญ่ อย่างไรก็ตาม กระบวนการนี้อาจทำให้เกิดการตกค้างของตัวทำละลายอินทรีย์ที่เป็นอันตราย รวมถึงเอ็น-เฮกเซน เบนซีน โทลูอีน ไซลีน สไตรีน และไดไวนิลเบนซีน สารตกค้างเหล่านี้อาจเป็นพิษต่อร่างกายมนุษย์ ดังนั้นจึงจำเป็นอย่างยิ่งที่จะต้องสร้างวิธีการวิเคราะห์ที่ละเอียดอ่อนและแม่นยำสำหรับการตรวจสอบอย่างเข้มงวด

การศึกษานี้ดำเนินการตามตำราเภสัชตำรับจีนฉบับล่าสุด โดยใช้โครมาโตกราฟีก๊าซ Wayeal Technology GC6100 ที่ติดตั้งเครื่องตรวจจับไอออไนเซชันเปลวไฟ (FID) และใช้ร่วมกับเครื่องเก็บตัวอย่างเฮดสเปซอัตโนมัติสำหรับการตรวจวัดสารตกค้างของเรซินในตัวอย่างซาโปนิน Panax notoginseng

คำสำคัญ: ซาโปนิน Panax notoginseng; ตัวทำละลายตกค้าง แก๊สโครมาโทกราฟี เครื่องตรวจจับ FID; เฮดสเปซ

1. วิธีการทดลอง

1.1 การกำหนดค่าเครื่องมือ

ตารางที่ 1 รายการการกำหนดค่าของแก๊สโครมาโตกราฟี

1.2 วัสดุทดลองและอุปกรณ์เสริม

มาตรฐานอ้างอิง: วัสดุอ้างอิงที่ผ่านการรับรองของสารละลายมาตรฐาน n-hexane, เบนซิน, โทลูอีน, p-xylene, o-xylene, สไตรีน, 1,2-ไดเอทิลเบนซีน และไดไวนิลเบนซีน (ซื้อภายในบริษัท) เก็บไว้ในภาชนะปิดสนิทภายใต้ตู้เย็นและป้องกันจากแสง

N,N-ไดเมทิลฟอร์มาไมด์;

ก๊าซพาหะ: ไนโตรเจนที่มีความบริสุทธิ์สูง

เครื่องกำเนิดไฮโดรเจน

เครื่องกำเนิดอากาศ

เครื่องเก็บตัวอย่างเฮดสเปซอัตโนมัติ

ขวดแก้วเฮดสเปซ: ขวดแก้วเฮดสเปซ (20 มล.)

1.3 เงื่อนไขการทดสอบ

1.3.1 เงื่อนไขอ้างอิงสำหรับ Headspace Sampler

อุณหภูมิเตาอบ: 90°ซี;

ระยะฟักตัว: 30 นาที;

อุณหภูมิวาล์วฉีด: 110°ซี;

อุณหภูมิสายโอน: 120°ซี;

ปริมาตรการฉีด: 1.0 มล. (ปริมาตรแบบวนรอบ)

1.3.2 เงื่อนไขการทำงานอ้างอิงสำหรับแก๊สโครมาโตกราฟี

คอลัมน์วิเคราะห์: คอลัมน์เส้นเลือดฝอย FFAP, 30ม×0.25มม×0.25มม

โปรแกรมอุณหภูมิ: อุณหภูมิคอลัมน์เริ่มต้น 60°C ค้างไว้ 16 นาที จากนั้นเพิ่มขึ้นเป็น 200°C ในอัตรา 20°C/นาที และคงไว้เป็นเวลา 2 นาที;

อัตราการไหลของคอลัมน์: 1.0 มล./นาที;

อุณหภูมิขาเข้า: 240°ซี;

อุณหภูมิของเครื่องตรวจจับ: 300°ซี;

อัตราการไหลของอากาศ: 300 มล./นาที;

อัตราการไหลของไฮโดรเจน: 40 มล./นาที;

อัตราการไหลของการแต่งหน้า: 20mL/min;

การฉีดแบบแยกส่วนด้วยอัตราส่วนการแยก 2:1

1.4 การเตรียมสารละลาย

1.4.1 การเตรียมสารละลายสต็อกมาตรฐานอ้างอิง

ชั่งน้ำหนักในปริมาณที่เหมาะสมตามมาตรฐานอ้างอิงของเอ็น-เฮกเซน เบนซีน โทลูอีน พี-ไซลีน โอ-ไซลีน สไตรีน 1,2-ไดเอทิลเบนซีน และไดไวนิลเบนซีน แล้วละลายใน N,N-ไดเมทิลฟอร์มาไมด์เพื่อเตรียมสารละลายที่ประกอบด้วย 20มกรัม/มิลลิลิตร ของเอ็น-เฮกเซน, โทลูอีน, พี-ไซลีน, โอ-ไซลีน, สไตรีน, 1,2-ไดเอทิลเบนซีน และไดไวนิลเบนซีน และ 4 อย่างละมกรัม/มิลลิลิตรของเบนซีน ตามลำดับ ซึ่งทำหน้าที่เป็นสารละลายมาตรฐานอ้างอิง

1.4.2 การเตรียมแนวทางการทำงานแบบผสมมาตรฐาน

ถ่ายสารละลายสต็อกมาตรฐานอ้างอิงจำนวน 2 มล. ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 50 มล. อย่างถูกต้อง เจือจางปริมาตรด้วยสารละลาย N,N-ไดเมทิลฟอร์มาไมด์ 25% และผสมให้เข้ากัน ถ่ายสารละลายนี้ 5 มล. ลงในขวดขนาด 20 มล. ปิดผนึก และได้รับสารละลายมาตรฐานแบบผสมอย่างถูกต้อง

1.4.3 การเตรียมสารละลายมาตรฐานสำหรับการทดสอบขีดจำกัดการตรวจจับ

ถ่ายสารละลายสต็อกมาตรฐานอ้างอิงจำนวน 2 มล. ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 500 มล. อย่างถูกต้อง เจือจางให้ได้ปริมาตรด้วยสารละลาย N,N-ไดเมทิลฟอร์มาไมด์ 25% และผสมให้เข้ากัน ถ่ายสารละลายนี้ 5 มล. ลงในขวดขนาด 20 มล. ปิดผนึก และได้รับสารละลายมาตรฐานสำหรับการทดสอบขีดจำกัดการตรวจจับอย่างแม่นยำ

2. ผลลัพธ์และการสนทนา

2.1 การวิเคราะห์เชิงคุณภาพของมาตรฐานอ้างอิง

รูปที่ 1 โครมาโตแกรมของตัวทำละลายเปล่า

รูปที่ 2 โครมาโตแกรมของโซลูชันการทำงานมาตรฐานแบบผสม

ตารางที่ 2 พารามิเตอร์โครมาโตกราฟีของโซลูชันการทำงานมาตรฐานแบบผสม

หมายเหตุ: โครมาโตกราฟีข้างต้นแสดงให้เห็นว่าพีคของโครมาโตกราฟีทั้งหมดแยกจากกันอย่างดี โดยมีความละเอียดมากกว่า 1.5 ซึ่งเป็นไปตามข้อกำหนดสำหรับการวิเคราะห์เชิงทดลอง

2.2 การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ

รูปที่ 3 โครมาโตแกรมซ้อนทับของโซลูชันการทำงานมาตรฐานแบบผสมสำหรับการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ (n=5)

ตารางที่ 3 พารามิเตอร์โครมาโตกราฟีของโซลูชันการทำงานมาตรฐานแบบผสมสำหรับการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ

หมายเหตุ: สารละลายมาตรฐานแบบผสมถูกฉีดอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 5 ครั้ง และ RSD ของพื้นที่จุดสูงสุดคือ≤1.5%

2.3 ขีดจำกัดการตรวจจับ

รูปที่ 4 โครมาโตแกรมของสารละลายมาตรฐานสำหรับการทดสอบขีดจำกัดการตรวจจับ

ตารางที่ 4 พารามิเตอร์โครมาโตกราฟีของสารละลายมาตรฐานสำหรับการทดสอบขีดจำกัดการตรวจจับ

หมายเหตุ: ขีดจำกัดการตรวจจับ (LOD) ถูกกำหนดไว้ที่อัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวน (S/N) ที่ 3 และขีดจำกัดของการวัดปริมาณ (LOQ) ถูกกำหนดที่อัตราส่วนสัญญาณต่อเสียงรบกวน (S/N) เท่ากับ 10 พบว่าทั้งค่า LOD และ LOQ ตรงตามข้อกำหนดของมาตรฐาน

2.4 การวิเคราะห์ตัวอย่าง

ชั่งน้ำหนักตัวอย่างแต่ละตัวอย่างประมาณ 0.1 กรัมอย่างแม่นยำ (0.1017 กรัม 0.1026 กรัม และ 0.1023 กรัม ตามลำดับ) ลงในขวดขนาด 20 มล. ที่แยกจากกัน จากนั้นเติมสารละลาย N, N-ไดเมทิลฟอร์มาไมด์ 25% 5 มล. ลงในขวดแต่ละขวด ปิดผนึก และเขย่าให้เข้ากันเพื่อผสม

รูปที่ 5 โครมาโตแกรมที่ซ้อนทับของสารละลายตัวอย่างทั้งสาม

รูปที่ 6 โครมาโตแกรมที่ซ้อนทับของสารละลายตัวอย่างและสารละลายมาตรฐานอ้างอิง

หมายเหตุ: ไม่พบเอ็น-เฮกเซน เบนซีน โทลูอีน พี-ไซลีน โอ-ไซลีน สไตรีน 1,2-ไดเอทิลเบนซีน หรือไดไวนิลเบนซีนในตัวอย่าง

3. บทสรุป

ในการศึกษานี้ มีการใช้แก๊สโครมาโตกราฟี Wayeal GC6100 ที่ติดตั้งเครื่องตรวจจับไอออไนเซชันเปลวไฟ (FID) และใช้ร่วมกับเครื่องเก็บตัวอย่างเฮดสเปซอัตโนมัติ เพื่อตรวจวัดสารตกค้างของเรซินในตัวอย่างซาโปนิน Panax notoginseng ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าพีคของโครมาโตกราฟีทั้งหมดแยกจากกันอย่างดี โดยมีความละเอียดมากกว่า 1.5 ซึ่งตรงตามข้อกำหนดสำหรับวัตถุประสงค์ในการวิเคราะห์ ผลการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำและขีดจำกัดการตรวจจับของวิธีนี้ทั้งหมดตรงตามข้อกำหนดที่ระบุ ไม่พบสาร n-hexane, เบนซิน, โทลูอีน, p-xylene, o-xylene, สไตรีน, 1,2-ไดเอทิลเบนซีน หรือไดไวนิลเบนซีนในตัวอย่างทดสอบ ซึ่งบ่งชี้ผลลัพธ์ที่น่าพอใจ ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าเครื่องโครมาโตกราฟีก๊าซ Wayeal GC6100 สามารถตอบสนองข้อกำหนดในการวิเคราะห์สำหรับการตรวจหาสารตกค้างของเรซินในตัวอย่างซาโปนิน Panax notoginseng ได้อย่างเต็มที่

4. ความสนใจ

การดำเนินการทั้งหมดที่เกี่ยวข้องกับการเตรียมตัวทำละลายและสารละลายมาตรฐาน รวมถึงการปรับสภาพตัวอย่าง ควรดำเนินการในตู้ดูดควัน ควรสวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่เหมาะสมตามข้อกำหนดความปลอดภัยของห้องปฏิบัติการเพื่อหลีกเลี่ยงการสัมผัสกับผิวหนังและเสื้อผ้า