การกำหนดโรดามีน บี ในผงพริกด้วยระบบ WAYEAL LCMS-TQ9200 LCMS/MS

โรดามินบี (ยังเรียกว่า โรสเรดบี หรือเบสซิกไวโอเล็ต 10) เป็นสารสีหลอดธาตุประกอบสังเคราะห์ที่อยู่ในกลุ่มสารเคมีแซนเทนสารนี้เองมีสีแดงชมพูสดใส และละลายได้ง่ายในสารละลายขั้ว เช่น น้ําและเอธานอลในเบื้องต้นมันถูกใช้อย่างแพร่หลายในสาขาอุตสาหกรรมรวมถึงผ้า, การพิมพ์, และการติดป้ายแสงสว่าง เนื่องจากราคาถูกและความสามารถในการสีที่แข็งแรงบางคนค้าที่ไม่ชอบธรรม ได้เพิ่มมันไปในอาหารอย่างผิดกฎหมาย เพื่อใช้ในการสีเช่น ผงพริกชิลิ ผงพริกเชียงใหม่ ผลิตภัณฑ์เนื้อ และเครื่องปรุงรส ทําให้มันเป็นสารพิษที่สําคัญที่เสี่ยงต่อความปลอดภัยของอาหาร
โรดามินบีเป็นสารพิษที่ชัดเจนต่อร่างกายมนุษย์ มันสามารถเข้าไปในร่างกาย ผ่านกระบวนการย่อยอาหารหรือผิวหนังมันอาจมีอันตรายต่อมะเร็งและมูตาเจนผลลัพธ์คือมันถูกจัดอันดับเป็นสารที่ไม่สามารถรับประทานได้ และถูกห้ามในอาหารโดยหลายประเทศและอัตราการตรวจพบของมันยังคงสูงอย่างต่อเนื่องในเครื่องเทศและอาหารแปรรูปต่างๆ.

ในคําแนะนําคําขอนี้ a liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of Rhodamine B in food was established using the WAYEAL LCMS-TQ9200 liquid chromatography-tandem mass spectrometry systemวิธีนี้สามารถสกัดได้อย่างมีประสิทธิภาพ การแยกแยกอย่างแม่นยํา และการปรับปริมาณของสารวิเคราะห์เป้าหมายได้อย่างละเอียด โดยกําจัดการแทรกแซงเมทริกซ์อาหารได้อย่างมีประสิทธิภาพมันให้การสนับสนุนทางเทคนิคที่น่าเชื่อถือ สําหรับการตรวจฉลากอย่างรวดเร็วและการกําหนดปริมาณที่แม่นยําของโรดามิน B ในอาหารโดยอํานวยความสะดวกให้กับการควบคุมความปลอดภัยของอาหารอย่างมีประสิทธิภาพ

คําสําคัญ: ความปลอดภัยของอาหาร โรดามิน B LCMS/MS

1อุปกรณ์และสารแก้ไข

1.1 การตั้งค่าเครื่องมือ

ตารางที่ 1 รายการการตั้งค่าเครื่องมือ

1.2 รายการสารปฏิกิริยาและมาตรฐาน

ตารางที่ 2 สารปฏิกิริยาและรายการมาตรฐาน

1.3 วัสดุการทดลองและอุปกรณ์ช่วย

เครื่องผสมเวอร์เท็กซ์

เครื่องหลอมศูนย์กลางความเร็วสูง

เงินสมดุลการวิเคราะห์

เครื่องสกัดสกัดระยะแข็ง (SPE) (มีปั๊มระบายความว่าง)

เครื่องระเหยไนโตรเจน

เครื่องสั่นวงโคจร

2วิธีการทดลอง

2.1 การเตรียมสารละลาย

2.1.1 กรดมด 0.1% ในน้ํา: โอนกรดมด 1 มิลลิตรไปใน 500 มิลลิตรของน้ํา, ผสมให้ดี, และนําไปยังปริมาณสุดท้ายของ 1000 มิลลิตรของน้ํา

2.1.2 0.1% กรดมดในอะเซตอนิทรีล: โอนกรดมด 1 มิลลิตรไปในอะเซตอนิทรีล 500 มิลลิตร ผสมให้ละเอียด และปรับให้มีปริมาณ 1000 มิลลิตรกับอะเซตอนิทรีล

2.1.3 เมธาโนลในน้ํา 50%: โอนเมธาโนล 500mL ให้แม่นยําเข้าไปในถังขนาด 1 ลิตร แล้วปรับให้มีขนาดด้วยน้ํา

2.1.4 เมธาโนล 50% ในน้ํากับกรดมะเร็ง 0.1%: โอนกรดมะเร็ง 1 มิลลิตรไปใน 500 มิลลิตรของเมธาโนล 50% ในน้ํา, ผสมให้ละเอียด, และละลายเป็นปริมาณ 1000 มิลลิตรกับเมธาโนล 50% ในน้ํา

2.1.5 5% แอมโมเนียในเมธาโนล: โอน 5 ml ของสารละลายแอมโมเนียไปในกล่องขนาด 100 ml, ลดน้ําหนักให้เต็มไปด้วยเมธาโนล, และผสมให้ดี

2.2 การรักษาตัวอย่างก่อน

2.2.1 การสกัดตัวอย่าง

น้ําหนักตัวอย่าง 1 กรัมของปุ๊ดปริกพริกอย่างแม่นยําเข้าไปในหลอดเซ็นทริฟิวจ์พลาสติก 50 มิลลิลิตร. เพิ่ม 10.0 มิลลิลิตรของสารละลายน้ําเมธาโนล 50% ที่มีกรดมะนาว 0.1% และผสมให้ดีเพิ่ม homogenizers เซรามิกสอง, จากนั้นหมุนเวียนเป็นเวลา 15 นาทีบนเครื่องผสมหมุนเวียน วางเซ็นทริฟิวเกอร์ที่ 8000 รอบ / นาทีเป็นเวลา 10 นาที โอน 3 ml ของ supernatant (ชั้นสกัด) และกรองผ่าน 0.ผิวกรองระยะอินทรีย์ 45μm ก่อนการชําระ.

2.2.2 การทําความสะอาดตัวอย่าง

การปรับปรุงกระสุน NovaPre MCX Solid Phase Extraction (SPE): ก่อนการใช้ ใช้กระสุนด้วย 3 ml ของเมธาโนลและ 3 ml ของน้ํา

ดึงยํา 1.0 mL ของสารสกัดเข้าในกล่อง NovaPre MCX การสกัดในระยะแข็ง (SPE) ให้ละเอียด ล้างกล่องด้วยน้ํา 3 mL ของกรดมด 0.1%และ 3mL ของเมธาโนล. ละลายเป้าหมายด้วยอะโมเนียก 6 มิลลิตรในสารละลายเมธาโนล และรวบรวมเอลูเอท อายูเอทจนเกือบแห้งภายใต้กระแสของไนโตรเจนที่ 45 °C ปล่อยเหลือใน 0.5mL ของระยะเคลื่อนไหวเริ่มต้น, ตัดผ่านเยื่อกรองระยะอินทรีย์ 0.22μm แล้วฉีดกรองเพื่อวิเคราะห์ด้วยเครื่องมือ

2.3 สภาพการทดลอง

2.3.1 สภาพ HPLC

คอลัมน์ Chromatographic: C18, 1.7μm, 2.1 * 50mm
ระยะเคลื่อนย้าย: ระยะ A: 0.1% ไส้ปรีมในน้ํา; ระยะ B: 0.1% ไส้ปรีมในอะเซโตนิทรีล
อัตราการไหล: 0.4 mL/นาที
อุณหภูมิเสา: 40 °C
ปริมาตรการฉีด: 1μL

2.3.2 สถานการณ์การวัดสเปคตรเมตรมวล

ตารางที่ 3 ปารามเมตรสเปคตรเมตรมวลสารประกอบ

หมายเหตุ: * อิออนปริมาณ

3ผลการทดลอง

3.1 มาตรฐาน โครมาโตแกรม

การตรวจพบของโรดามิน B ได้เสร็จสิ้นภายใน 7 นาที ดังที่แสดงในรูป 1 สารประกอบสูงสุดแสดงรูปร่างสูงสุดที่ดีและการตอบสนองที่พึงพอใจตอบสนองความต้องการในการกําหนดด้วยการทดลอง.

รูปที่ 1 โครมาโตแกรมของโรดามิน B

3.2 ระยะทางเส้น

จํานวนที่เหมาะสมของโลหิตทํางานแบบมาตรฐานของโรดามินบีถูกโอนและละลายอย่างแม่นยํากับระยะเคลื่อนที่เริ่มต้นเพื่อเตรียมเส้นโค้งแบบมาตรฐาน ระยะเส้นตรงคือ 0.1 10 ng / mLความเบี่ยงเบนระหว่างผลลัพธ์เชิงเส้นและปริมาณปริมาณที่ทราบอยู่ในระยะเบี่ยงเบนที่อนุญาตสูงสุดคออฟเฟกชั่นการกําหนด (R2) มากกว่า 0999, แสดงถึงการเป็นเส้นตรงที่ดี

รูปที่ 2 โรดามิน B สแตนดาร์ดโค้ง

3.3 ขอบเขตการปรับปริมาณและขอบเขตการตรวจสอบ

ในวิธีนี้ ขอบเขตการตรวจพบ (LOD) และขอบเขตการปรับปริมาณ (LOQ) สําหรับโรดามิน B ได้ถูกกําหนดเป็น 0.1 ng/mL และ 0.5 ng/mL ตามลําดับอัตราการสัมพันธ์สัญญาณกับความรุนแรง (S/N) ที่ตรงกันได้ถูกสรุปในตารางด้านล่างอัตราส่วน S/N ที่ LOD มากกว่า 3 ส่วนที่ LOQ มากกว่า 10

ตารางที่ 4 ขีดจํากัดการระบุปริมาณและขีดจํากัดการตรวจสอบ

รูปที่ 3 อัตราต่อรองสัญญาณกับเสียงเสียงใน LOD สําหรับโรดามิน B (0.1 ng/mL)

รูปที่ 4 อัตราต่อรองสัญญาณกับเสียงเสียงที่ LOQ สําหรับโรดามิน B (0.5 ng/mL)

3.4 ความซ้ํา

โซลูชั่นมาตรฐานในปริมาณ 3 คอนเซนทราชั่น (0.5ผลกระทบจากการตรวจสอบการรักษาของโรดามิน B ในระยะยาวของ 5 กม.กลาง, และปริมาณปริมาณสูงทั้งหมดอยู่ในระดับ 5% ซึ่งตรงกับความต้องการในการทดลอง

ตารางที่ 5 การทดสอบความซ้ําสําหรับโรดามิน B ในปริมาณต่ํา, กลางและสูง

รูปที่ 5 โครมาโตแกรมของ 6 การฉีด 0.5ng/mL โรดามิน B

รูปที่ 6 โครมาโตแกรมของ 6 การฉีด 2 ng/mL โรดามิน B

รูปที่ 7 โครมาโตแกรมของ 6 การฉีด 5 ng/mL โรดามิน B

3.5 การฟื้นฟูจุดสูง

ตัวอย่าง A ได้รับการปรับปรุงด้วยสารละลายมาตรฐานเพื่อเพิ่มปริมาณโรดามิน B เพิ่มขึ้น 2 ng / mL. จากนั้นมีการวิเคราะห์การฉีดซ้ํา 6 ครั้ง. ผลการฟื้นฟูที่ได้รับคือ 105.7% กับ RSD 1.473%,ตอบสนองเกณฑ์การยอมรับวิธี.

3.6 การขนส่ง

หลังจากฉีดสารแก้วมาตรฐาน 10 ng/mL ผสมสารละลายว่างเพื่อการประเมินการย้ายผลลัพธ์แสดงในรูปด้านล่างการนําไปในที่ว่างมีน้อยกว่า 10% ของมาตรฐานการปรับระดับต่ําสุด (0.1 ng/mL) ตอบสนองความต้องการการทดลอง

รูปที่ 8 โครมาโตแกรมว่างของสารประกอบ

3.7 การทดสอบตัวอย่าง

สมาธิของโรดามิน B ในตัวอย่าง A อยู่ใต้ขีดจํากัดการตรวจสอบด้วยวิธี (MDL)

รูปที่ 9 โครมาโตแกรมของโรดามิน B ในตัวอย่าง A

4สรุป

ในการศึกษานี้, การวัดขนาดของ Rhodamine B โดยใช้วิธีการ LCMS-TQ9200 ของ WAYEAL ได้พัฒนาวิธีการวัดขนาดของ Rhodamine B โดยใช้วิธีการ LCMS-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS)ข้อมูลที่ได้รับแสดงให้เห็นว่าวิธีการผลิตจุดสูงของโครมาโทกราฟิกที่มีความสมองที่ดีและไม่มีการ, และความรู้สึกตอบสนองความต้องการการทดลอง999, ตอบสนองเกณฑ์ความเป็นเส้นตรง ความซ้ํา (RSD) ในปริมาณต่ํา, กลางและสูงอยู่ใน 5% และการย้ายไปในความว่างที่ต่ํากว่า 10% ของมาตรฐานการปรับระดับต่ําสุด.ผลที่ได้แสดงให้เห็นว่าวิธีการนี้ เมื่อเชื่อมโยงกับระบบ WAYEAL LC-MS/MS สามารถตอบสนองความต้องการการตรวจหาเชิงคุณภาพและปริมาณเป็นประจําสําหรับตัวแอนาลิตเป้าหมายได้