2025-11-04
ในฐานะนิวคลีโอไทด์ ยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP) เป็นสารตัวกลางสำคัญในการเผาผลาญกรดนิวคลีอิกในสิ่งมีชีวิต เป็นนิวคลีโอไทด์ที่มีมากที่สุดในนมของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม และความต้องการทางอาหารสำหรับยูริไดเลตสูงกว่านิวคลีโอไทด์อื่นๆ อย่างมีนัยสำคัญในช่วงการเจริญเติบโตและพัฒนาการของลูกหลาน ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา การวิจัยได้เปิดเผยว่า UMP ไม่เพียงแต่มีส่วนร่วมในการเผาผลาญพลังงานและการสังเคราะห์ RNA เท่านั้น แต่ยังช่วยเพิ่มการทำงานของสิ่งกีดขวางในลำไส้โดยการปรับเปลี่ยนวิถีการส่งสัญญาณของเซลล์ นอกจากนี้ ยังทำงานร่วมกับวิตามินที่ละลายในไขมันเพื่อส่งเสริมการดูดซึมสารอาหารและการทำงานของภูมิคุ้มกัน UMP มักถูกเติมเป็นสารเสริมโภชนาการในนมผงสำหรับทารกและอาหารสัตว์/สัตว์ปีก ซึ่งความบริสุทธิ์และความเข้มข้นส่งผลโดยตรงต่อคุณค่าทางโภชนาการและความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย
คำสำคัญ:สารเสริมโภชนาการอาหาร, UMP, นิวคลีโอไทด์, โครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง
1. เครื่องมือและน้ำยา
1.1 รายการการกำหนดค่า HPLC
ตารางที่ 1 รายการการกำหนดค่า HPLC
| เลขที่ | โมดูลาร์ | จำนวน |
| 1 | LC3200 โครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง | 1 |
| 2 | ปั๊มแรงดันสูงแบบไบนารี P3210B | 1 |
| 3 | เตาอบคอลัมน์ CT3400 | 1 |
| 4 | AS3210 Autosampler | 1 |
| 5 | UV3210 UV Detector | 1 |
| 6 | SmartLab CDS 2.0 Workstation | 1 |
| 7 | Nova Element AQC18 5μm 4.6*250mm | 1 |
1.2 น้ำยาและมาตรฐาน
ตารางที่ 2 รายการน้ำยาและมาตรฐาน
| เลขที่ | น้ำยาและมาตรฐาน | ความบริสุทธิ์ |
| 1 | 5'-โมโนฟอสเฟต | 96.2% |
| 2 | ยูริดีน | 98% |
| 3 | ยูราซิล | 98% |
1.3 วัสดุการทดลองและอุปกรณ์เสริม
เครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิก
เครื่องผสม Vortex
2. วิธีการทดลองและเงื่อนไข
คอลัมน์โครมาโทกราฟี: Nova Element AQC18, 5μm 4.6x250mm.
3. ผลการทดลอง
3.1 การทดสอบความเหมาะสมของระบบ
การทดสอบความเหมาะสมของระบบแสดงให้เห็นว่ายอดเป้าหมายมีรูปร่างที่ดี มีจำนวนแผ่นทฤษฎีสูง และไม่มียอดรบกวนในบริเวณใกล้เคียง ดังนั้นจึงเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลองทั้งหมด
รูปที่ 1 โครมาโทแกรมของสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต
ตารางที่ 3 ผลการทดสอบสำหรับสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | Tailing Factor | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| UMP | 5.559 | 322.525 | 55.643 | 1.130 | 23689 |
3.2 การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำ
สารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP) ถูกฉีดหกครั้ง ค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ (RSD) ของเวลาในการคงสภาพคือ 0.085% และของพื้นที่ยอดคือ 0.191% ทั้งสองค่าต่ำกว่าขีดจำกัดที่ระบุไว้ที่ 2.0% ซึ่งแสดงให้เห็นว่าสอดคล้องกับข้อกำหนดในการทดลอง
รูปที่ 2 โครมาโทแกรมของการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำของยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP)
ตารางที่ 4 ผลการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำสำหรับยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP)
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) |
| ยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต | 5.559 | 322.525 |
| 5.559 | 323.013 | |
| 5.559 | 323.958 | |
| 5.561 | 322.753 | |
| 5.568 | 323.072 | |
| 5.569 | 322.141 | |
| RSD(%) | 0.085 | 0.191 |
3.3 การทดสอบตัวอย่าง
พื้นที่ยอดของสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (20 มก./ลิตร) คือ 322.525 ในขณะที่ของสารละลายตัวอย่างทดสอบคือ 274.211 จากวิธีการมาตรฐานภายนอก พบว่าปริมาณ UMP ในตัวอย่างคือ 17 มก./ลิตร
รูปที่ 3 โครมาโทแกรมของตัวอย่างทดสอบ
ตารางที่ 5 ผลการทดสอบตัวอย่าง
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | SNR | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | 5.568 | 274.211 | 47.321 | 14710.024 | 24266 |
3.4 การทดสอบความเหมาะสมของระบบสำหรับสารที่เกี่ยวข้อง
การทดสอบสารละลายความเหมาะสมของระบบสำหรับสารที่เกี่ยวข้องแสดงให้เห็นว่ายอดสารประกอบทั้งหมดมีรูปร่างที่ดี มีจำนวนแผ่นทฤษฎีสูง และความละเอียดมากกว่า 2.0 ดังนั้นจึงเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลอง
รูปที่ 4 โครมาโทแกรมของสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP)
ตารางที่ 6 ผลการทดสอบสำหรับสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟต (UMP)
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | Tailing Factor | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | 5.570 | 326.631 | 8.682 | 1.121 | 24708 |
| ยูราซิล | 7.097 | 839.625 | 28.844 | 1.033 | 18284 |
| ยูริดีน | 17.367 | 446.693 | n.a. | 0.995 | 19136 |
3.5 การทดสอบความสามารถในการทำซ้ำของตัวอย่าง
หลังจากฉีดสารละลายความเหมาะสมของระบบติดต่อกันหกครั้ง ความสามารถในการทำซ้ำของเวลาในการคงสภาพสำหรับ 5'-UMP, ยูราซิล และยูริดีนคือ 0.031%, 0.058% และ 0.102% ตามลำดับ ในขณะที่ความสามารถในการทำซ้ำของพื้นที่ยอดคือ 0.243%, 0.134% และ 0.134% ตามลำดับ ซึ่งเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลอง
รูปที่ 5 โครมาโทแกรมของการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำของตัวอย่าง
ตารางที่ 7 ผลการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำของเวลาในการคงสภาพของสารที่เกี่ยวข้อง
| สารประกอบ | 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | ยูราซิล | ยูริดีน |
| เวลาในการคงสภาพ (นาที) | 5.570 | 7.097 | 17.367 |
| 5.573 | 7.092 | 17.371 | |
| 5.571 | 7.089 | 17.360 | |
| 5.570 | 7.093 | 17.380 | |
| 5.570 | 7.091 | 17.363 | |
| 5.574 | 7.100 | 17.048 | |
| RSD (%) | 0.031 | 0.058 | 0.102 |
ตารางที่ 8 ผลการทดสอบความสามารถในการทำซ้ำของพื้นที่ยอดของสารที่เกี่ยวข้อง
| สารประกอบ | 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | ยูราซิล | ยูริดีน |
| พื้นที่ยอด | 326.631 | 839.625 | 446.693 |
| 326.175 | 841.410 | 447.261 | |
| 326.126 | 841.330 | 447.299 | |
| 327.412 | 842.394 | 448.319 | |
| 327.832 | 841.747 | 447.324 | |
| 327.850 | 842.911 | 448.083 | |
| RSD (%) | 0.243 | 0.134 | 0.134 |
3.6 การทดสอบความไวสำหรับสารที่เกี่ยวข้อง
อัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนของยอดหลัก 5'-UMP ในสารละลายทดสอบความไวสำหรับสารที่เกี่ยวข้องสูงกว่า 3 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลอง
รูปที่ 6 โครมาโทแกรมของสารละลายทดสอบความไวของสารที่เกี่ยวข้อง
ตารางที่ 9 ผลการทดสอบของสารละลายความไวของสารที่เกี่ยวข้อง
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | SNR | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | 5.573 | 26.797 | 4.638 | 949.156 | 24519 |
3.7 การทดสอบสารละลายอ้างอิงและตัวอย่างสารที่เกี่ยวข้อง
พื้นที่ยอดของสารละลายอ้างอิง (17 มก./ลิตร) คือ 275.856 พื้นที่ยอดรวมของสิ่งเจือปนในสารละลายทดสอบ ยกเว้น 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต คือ 38.021 การคำนวณโดยใช้วิธีมาตรฐานภายนอก ปริมาณสิ่งเจือปนในตัวอย่างคือ 2.343 มก./ลิตร
รูปที่ 7 โครมาโทแกรมของการทดสอบสารละลายอ้างอิงของสารที่เกี่ยวข้อง
ตารางที่ 10 ผลการทดสอบของสารละลายอ้างอิงของสารที่เกี่ยวข้อง
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | SNR | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | 5.572 | 275.856 | 47.414 | 14576.232 | 24512 |
รูปที่ 8 โครมาโทแกรมของการทดสอบสารละลายตัวอย่างของสารที่เกี่ยวข้อง
ตารางที่ 11 ผลการทดสอบสำหรับสารละลายตัวอย่างที่เกี่ยวข้อง
| สารประกอบ | เวลาในการคงสภาพ (นาที) | พื้นที่ยอด (mAU*s) | ความสูงยอด | SNR | จำนวนแผ่นทฤษฎี |
| 1 | 3.847 | 7.952 | 1.412 | 433.935 | 114734.178 |
| 2 | 4.178 | 4.358 | 0.710 | 218.248 | 11310 |
| 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต | 5.548 | 12576.642 | 1964.994 | 603778.520 | 196687.093 |
| ยูราซิล | 7.093 | 218.727 | 26.939 | 8277.393 | 18342 |
| ยูริดีน | 17.355 | 2810.366 | 145.230 | 44624.340 | 19058 |
4. บทสรุป
ในการทดลองนี้ โดยอ้างอิงถึง "GB 1903.69-2024 มาตรฐานความปลอดภัยด้านอาหารแห่งชาติ: สารเสริมโภชนาการอาหาร 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟต" การวิเคราะห์ดำเนินการโดยใช้ระบบโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง Wayeal LC3200 พร้อมด้วยเครื่องตรวจจับรังสีอัลตราไวโอเลต ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าการทดสอบความเหมาะสมของระบบแสดงให้เห็นรูปร่างยอดที่ดีสำหรับสารประกอบทั้งหมด จำนวนแผ่นทฤษฎีสูง และความละเอียดสูงกว่า 2.0 ซึ่งเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลอง ความสามารถในการทำซ้ำของเวลาในการคงสภาพสำหรับสารละลายมาตรฐานยูริดีน 5'-โมโนฟอสเฟตและสารที่เกี่ยวข้องต่ำกว่า 0.2% และความสามารถในการทำซ้ำของพื้นที่ยอดต่ำกว่า 0.3% ซึ่งบ่งชี้ถึงความสามารถในการทำซ้ำที่ดี สารละลายทดสอบความไวสำหรับสารที่เกี่ยวข้องแสดงอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนสำหรับยอดหลัก 5'-ยูริดีนโมโนฟอสเฟตสูงกว่า 3 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งเป็นไปตามข้อกำหนดในการทดลอง ผลการทดสอบตัวอย่างทั้งหมดเป็นปกติ ข้อมูลข้างต้นเป็นไปตามข้อกำหนดของเครื่องมือที่ระบุไว้ในวิธีการมาตรฐาน
ส่งข้อสอบของคุณตรงมาหาเรา
