2024-09-27
การกําหนดโพลีเอธีเลนกลิกอล โดยการใช้เคโรมาโตเกอรี่เจล
1. การนําเสนอ
วัตถุประสงค์: การกําหนดน้ําหนักโมเลกุลและการกระจายของโพลีเอธีเลนกลิกอล (PEG) โดยวิธีการเจลเพอร์เมชั่นโครมาโตเกอรี่ (GPC) ที่มีความสามารถสูง
วิธีการ:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7.8x300 mm คอลัมน์จีลเพรเมคชั่นโครมาโตเกอรี่
เครื่องตรวจจับอัตราการหดต่าง (RID)
ระยะเคลื่อนที่: น้ําที่บริสุทธิ์มาก
อัตราการไหล: 1.0 ml/นาที
อุณหภูมิเสา: 35 °C
ปริมาตรการฉีด: 10μl
การกําหนดเส้นโค้งการปรับขนาด และผลผลการวัดน้ําหนักโมเลกุลและการกระจายของตัวอย่างแต่ละตัว โดยใช้โปรแกรม GPC
ผลลัพธ์: ความเส้นตรงของ PEG ดีเมื่อน้ําหนักโมเลกุลอยู่ในช่วง 400-20000 ความสามารถในการทดลองได้ดีด้วยการฉีด PEG6000 6 ครั้งติดต่อกันค่า RSD ของเวลาเก็บรักษาคือ 0.105% และค่า RSD ของพื้นที่สูงสุดคือ 0.335%
สรุป: โครมาโตเกอรี่เจลเจล (GPC) ที่มีความสามารถสูง เป็นวิธีที่น่าเชื่อถือในการกําหนดน้ําหนักโมเลกุลและการกระจายของ PEGซึ่งมีข้อดีของการผลิตใหม่ได้อย่างแม่นยําและสูง เมื่อใช้ในการประเมินคุณสมบัติของพอลลิดิสเปอร์สิตี้ของผสมพอลิมเลอร์.
คําสําคัญ: HPLC, GPC, RID, โพลิเมอร์, โพลีเอธีเลนกลิกอล
2วิธีการทดลอง
2.1 การตั้งค่าเครื่องมือ
ตารางที่ 1 รายการการตั้งค่าของครอมาโทกราฟเหลวประสิทธิภาพสูง
ไม่ | โมดูล | Qty |
1 | โครมาโตเกอรี่เหลวประสิทธิภาพสูง LC3200 | 1 |
2 | PB3200 ปั๊มไบนารี | 1 |
3 | RID3300 | 1 |
4 | CT3200 เตาเผาเสา | 1 |
5 | AS3200 ออโตซัมเปลเลอร์ | 1 |
2.2 สภาพการทดสอบ
คอลัมน์ Chromatography: Xtimate SEC-120,5μm,7.8x300mm
อุณหภูมิคอลัมน์: 35°C
เครื่องตรวจจับ: RID
อัตราการไหล: 1.0mL/นาที
ระยะเคลื่อนที่: น้ํา
ปริมาตรการฉีด: 10μL
2.3 อุปกรณ์/สารปฏิกิริยาและวัสดุใช้
สารปฏิกิริยา:
น้ําที่บริสุทธิ์มาก
มาตรฐาน: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
อุปกรณ์ช่วย
ธนาคารวิเคราะห์
หน่วยสกัดสารละลาย
เครื่องทําความสะอาด ultrasonic
วัสดุทดลอง
ผิวกรอง: ผิวกรองน้ํา 0.45μm
2.4 การเตรียมมาตรฐาน PEG
ปิปเป็ตละ 0.20 กรัมของมาตรฐาน PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 และ PEG20000, เพิ่มน้ํา 10mL เพื่อละลาย, ผสมให้ดี, และเตรียมความถี่ของตัวอย่าง 20mg/mL เพื่อทดสอบ
3ผลและการหารือ
3.1 มาตรฐานน้ําหนักโมเลกุลต่าง ๆ
รูปที่ 1 โครมาโตแกรมของ PEG400
ตารางที่ 1 ปารามิเตอร์โครมาโตเกราฟิคของ PEG400
ไม่ | สารประกอบ | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด | เลขทะเบียน | ปัจจัยติดตาม |
1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
ตารางที่ 2 ปารามิเตอร์โครมาโตเกราฟิกของ PEG2000
ไม่ | สารประกอบ | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด | เลขทะเบียนทฤษฎี | ปัจจัยติดตาม |
1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
รูปที่ 3 โครมาโตแกรมของ PEG6000
ตารางที่ 3 ปริมาตรการเรืองสีของ PEG6000
ไม่ | สารประกอบ | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด | เลขทะเบียนทฤษฎี | ปัจจัยติดตาม |
1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
รูปที่ 4 โครมาโตแกรมของ PEG10000
ตารางที่ 4 ปารามิเตอร์โครมาโตเกราฟิคของ PEG10000
ไม่ | สารประกอบ | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด | เลขทะเบียนทฤษฎี | ปัจจัยติดตาม |
1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
รูปที่ 5 โครมาโตแกรมของ PEG20000
ตารางที่ 5 ปริมาตรการจารึกสีของ PEG20000
ไม่ | สารประกอบ | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด | เลขทะเบียนทฤษฎี | ปัจจัยติดตาม |
1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
รูปที่ 6 โครมาโตแกรมที่ซ้อนกันของน้ําหนักโมเลกุลที่แตกต่างกัน
หมายเหตุ: ข้อมูลด้านบนแสดงว่า เวลาในการเก็บรักษาของ PEG20000 คือ 6.081 นาที และ PEG400 คือ 10.315 นาที โมเลกุลขนาดใหญ่ถูกระคายก่อน และโมเลกุลขนาดเล็กถูกระคายหลัง
3.2 ความซ้ํา
รูปที่ 7 โครมาโทกรามการซ้ําซ้อนของ PEG6000 (n=6)
ตารางที่ 7 ปริมาตรการเรียงสีของ PEG6000 (n=6)
ไม่ | ตัวอย่าง | ระยะเวลาในการเก็บรักษา | พื้นที่สูงสุด |
1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
ค่าเฉลี่ย | - | 7.225 | 500.416 |
RSD ((%) | - | 0.105 | 0.335 |
หมายเหตุ: ความสามารถซ้ําได้ดี RSD ของเวลาการเก็บรักษาคือ 0. 105% และ RSD ของพื้นที่สูงสุดคือ 0. 335% สําหรับ 6 การฉีด PEG6000.
3.3 กุ้งมาตรฐาน
รูป 8 สภาพโค้งมาตรฐาน โครมาโตแกรมของน้ําหนักโมเลกุลที่แตกต่างกัน
ตารางที่ 8 คอร์ฟมาตรฐาน ปริมาตรโครมาโตกราฟิกของน้ําหนักโมเลกุลที่แตกต่างกัน
หมายเหตุ: น้ําหนักโมเลกุลและผลการกระจายของตัวอย่างแต่ละตัวถูกคํานวณโดยโปรแกรม GPC ความเส้นตรงของ PEG น้ําหนักโมเลกุลดีในช่วง 400 ถึง 20000, และสัมพันธ์เชิงเส้นคือ 0999.
4สรุป
การทดสอบพอลีเอธีเลนไกลโคล (PEG) นี้จะดําเนินการโดยการใช้เคโรมาโตเกอรี่เจล โดยใช้เคโรมาโตเกอรี่เหลวประสิทธิภาพสูงชุด LC3200 พร้อมเครื่องตรวจจับอัตราการหักความแตกต่างเวลาในการเก็บ PEG20000 คือ 60.081 นาที และ PEG400 คือ 10.315 นาที โมเลกุลขนาดใหญ่จะหลั่งออกมาก่อน และโมเลกุลขนาดเล็กจะหลั่งออกมาหลัง ความสามารถในการซ้ําเป็นอย่างดี RSD ของเวลาการเก็บรักษาคือ 0105% และ RSD ของพื้นที่สูงสุดคือ 0.335% สําหรับ 6 การฉีด PEG6000. ความเส้นตรงของน้ําหนักโมเลกุล PEG ดีในช่วง 400 ถึง 20,000, และสัมพันธ์เชิงเส้นคือ 09999. โครมาโตเกอรี่เจลเพอร์เมชั่นประสิทธิภาพสูง (GPC) เป็นวิธีที่น่าเชื่อถือในการกําหนดน้ําหนักโมเลกุลและการกระจายของ PEGซึ่งมีข้อดีของการผลิตผลที่แม่นยําและสามารถผลิตใหม่ได้ เมื่อใช้ในการประเมินคุณสมบัติของพอลลิดิสเปอร์สิตี้ของสารประกอบพอลลิเมอร์.
หมายเหตุ: ตัวอย่างควรปล่อยให้อยู่ในอุณหภูมิห้องนานกว่า 12 ชั่วโมง และให้ผสมผสานกันอย่างอ่อนโยน ไม่ใช้เสียงฉายาหรือสั่นแรงเพื่อเร่งการละลาย
ส่งข้อสอบของคุณตรงมาหาเรา